УДК 616.5-08.615.2-0
Статус дермы в процессе имплантации кристаллов гидроксиапатита
Кошкина Ульяна Гордеевна – студент Лечебного факультета Кубанского государственного медицинского университета.
Могильная Галина Михайловна – доктор медицинских наук, профессор, заведующий кафедрой Гистологии с эмбриологией Кубанского государственного медицинского университета.
Аннотация: Целью настоящего исследования является изучение процесса неоколлагеногенеза в зоне дермы под влиянием кристаллов гидроксиапатита. Работа выполнена на крысах, которым вводили препарат Radiess. Результат оценивали через 4 месяца после инъекции филлера. Оценку срезов проводили с использованием стандартных гистологических методов окраски и метода избирательного выявления коллагенов I и III типов. Установлено, процесс неоколлагеногенеза в дерме стимулируется кристаллами гидроксиапатита и этот эффект удерживается до 4 месяцев после инъекции филлера.
Ключевые слова: Дерма, фибробласт, радиесс, имплант, филлер, неоколлагеногенез в дерме.
Кристаллы гидроксиапатита кальция используют в современной косметологии в виде препарата радиесс. Степень его использования в клинике сравнивается с гиалуроновой кислотой (AS APS, 2012). Однако исследования, проводимые косметологической медициной, направлены на изучение механизма активации стареющей дермы с эффектом локальной пролиферации фибробластов и процесса неоколлагеногенеза [2].
Целью настоящего исследования является изучение механизма влияния кристаллов гидроксиапатита на клеточный состав и экстрацеллюлярный матрикс неизмененной дермы, но в пролонгированный период нахождения филлера в дерме в срок, соответствующий 4 месяцами с момента его введения.
Материал и методы. Объектом исследования послужили беспородные крысы-самцы весом 200-250 г (25 особей, ПЛЖ «Рапполово» Ленинградской области). Эксперимент проводился с разрешения Этического комитета ФГБОУ ВО КубГМУ Минздрава России с соблюдением «Правил проведения работ с использованием экспериментальных животных». Для инъекции нами был использован препарат Radiesse (Merz America, Inc., Raleigh, NC, USA). Препарат вводили субдермально в объеме 0,05 мл в заднюю часть шеи всем экспериментальным животным одновременно. В группе интактных животных (контроль) использовали стерильный физиологический раствор в той же дозе.
Оценку результатов проводили через 4 месяца после инъекции филлера. Для морфологического изучения использовали биоптаты кожи, которые подвергали стандартной гистологической обработке. Окраску срезов проводили гематоксилином и эозином, по Ван-Гизону, а также с помощью реакций Маллори и Массона. [1]. Для типирования фибриллярных структур дермы использовали окраску пикросириусом красным с последующим изучением микропрепаратов в поляризованном свете [3]. Иммуногисто-химическое выявление коллагена было проведено с использованием моно-клональных антител к коллагену I типа (ABCAM,USA). Все цифровые данные подвергались статистической обработке по программе Microsoft Ехсеll.
Результаты и обсуждение. Изучение микропрепаратов, окрашенных гематоксилином и эозином, спустя 4 месяца после инъекции препарата радиесс показало, что микросферы сохраняются на отдельных участках зоны инъекции и типируются за счет клеточно-фибриллярной оболочки, окру-жающей микросферу. Содержимое микросфер чаще отсутствует, что указывает на деградацию кристаллов гидроксиапатита, механизм их разрушения вероятнее всего происходит за счет ферментативного остеолизиса, а не фагоцитоза. При окраске по Ван-Гизону и Массону в зоне введения филлера выявляются тонкие коллагеновые фибриллы, вероятно не закончившие процесс внеклеточного фибриллогенеза. Пикросириус красный с последующей поляризационной микроскопией позволили обнаружить присутствие коллагенов I и III типов с превалированием первого.
В зоне экстрацеллюлярного матрикса появляется большое количество активных фибробластов, заполненных темно-коричневыми гранулами,– это проколлаген, выявляемый иммуногистохимически с помощью антител. Экзоцитоз гранул в зону внеклеточного матрикса может служить доказательством синтеза фибробластами коллагена. Проведенная морфомет-рия фибриллярного компонента матрикса указывает на увеличение его объе-ма по отношению к исходному уровню почти в 2 раза.
Таким образом, полученные данные позволяют считать, что препарат радиесс активирует фибробласты дермы и синтез ими коллагена. Механизм этой активации дискутируется в литературе, не исключено, что ведущим механизмом является увеличение объема экстрацеллюлярного матрикса за счет введения филлера, который активирует прикрепление фибробласта через поверхностные рецепторы (интегрины) к коллагену и другим белкам экстрацеллюлярного матрикса дермы. Эта связь выступает в качестве триггера, образующего локальный адгезивный комплекс, что инициирует «расправление» фибробласта и стимулирует продукцию им коллагена. В случае препарата радиесс такой эффект прослеживается до четырех месяцев после инъекции филлера.
Список литературы
- Pearce A. Histochemistry. Theoretical and applied. London. 1968. P.561.
- Varani J., Dame M.K. et al. Decreased Collagen Prodaktion in Chronologicaly Aged Skin// The American Journal of Pathology. 2006; Vol. 168(6). 1861-1868
- Rich L., Whittaker P. Collagen and Picrosirius Red Staining: a polarized light assessment of fibrillar hue and spatial distribution. //Braz.J. Morphol.Sci. 2005. Vol.22.P.97-104.