Состояние гемостаза у животных на фоне дополнительного введения медвежьего жира

Калашникова Светлана Петровна - старший преподаватель кафедры Медицинской и биологической химии Ханты-Мансийской государственной медицинской академии. (ХМГМА, г.Ханты-Мансийск)

Аннотация: В экспериментах на белых крысах показано, что дополнительное введение в пищевой рацион пищевого медвежьего жира повышает противосвертывающий потенциал плазмы крови и способствует минимализации процессов липопероксидации.

Ключевые слова: Система гемостаза, тромбоциты, плазмокоагуляция, липопероксидация, медвежий жир.

Анализ литературы последних лет свидетельствует о широкой распространенности нарушений системы гемостаза, обусловленных активацией процессов липопероксидации [2,3].

В связи с этим, в настоящее время все большее значение уделяется изучению природных лекарственных средств, которые обладают широким спектром терапевтического действия. Показано, что данные субстанции, как правило, малотоксичны, не вызывают побочных реакций, и одновременно оказывают мягкое гипокоагулемическое действие, на фоне общего позитивного воздействия на организм [3,4,5,6,7]. К таким широко изучаемым, на сегодняшний день, природным субстанциям относятся различные биологически активные добавки животного и растительного происхождения, в том числе и медвежий жир.

Цель работы.

Изучить состояние системы гемостаза и липопероксидации на фоне дополнительного приема медвежьего жира.

Материалы и методы исследования.

В исследованиях в качестве экспериментальных животных использовались самцы нелинейных белых крыс 3-4 -месячного возраста, весом 350-400 г. Число крыс в группах сравнения составляло 12.

Животные содержались на смешанном сбалансированном рационе с оптимальным соотношением белков, липидов и углеводов. В состав суточных порций опытных групп дополнительно вводили медвежий жир в дозе 0,08 мл на 100 г веса животного. Пероральное введение крысам медвежьего жира осуществляли в течение 14 суток, руководствуясь инструкцие й по применению медвежьего жира. Дозы изучаемой субстанции для животных были адекватны рекомендуемым дозам для человека, не вызывающим токсических эффектов. Контрольные группы препарат дополнительно не получали.

Болезненные манипуляции производили, подвергая животных наркозу этоксиэтаном. Пробы крови брали в шприц из обнаженной овальным разрезом яремной вены. Кровь для коагулологических исследований стабилизировали 3,8% раствором цитрата натрия в соотношении 1:9, а также 0,125% забуференным раствором глутаральдегида (для исследования морфологии тромбоцитов). Отбор проб, их последующая обработка, в том числе получение бедной тромбоцитами плазмы, соответствовали требованиям, принятым для коагулологических исследований [1].

Оценка плазменного гемостаза осуществлялась согласно инструкциям к наборам фирмы «Технология-стандарт» (г. Барнаул) на коагулографе «ACL-200» (США). Определение концентрации и морфологии тромбоцитов проводили путем световой микроскопии в камере Горяева по методу Шитиковой [8].

Липиды эритроцитов и тромбоцитов экстрагировали 40-кратным избытком спирто-эфирной смеси в соотношении 3:1 по объему. Скорость ПОЛ в клетках крови оценивали по содержанию диеновых конъюгатов (ДК) и продуктов, реагирующих с тиобарбитуровой кислотой (ТБК-РП), определяя оптическую плотность гептановой фазы при ?=232 нм и флуорометрически.

Результаты исследований, имеющие цифровое выражение, анализировали методом вариационной статистики для малых рядов наблюдений. Для оценки достоверности отличий вычисляли доверительный коэффициент Стъюдента (t) и степень вероятности (p). Различия считали достоверными при значениях p<0,05.

Результаты исследований и их обсуждение.

В плазме крови животных, получавших с рационом медвежий жир, наблюдалось снижение интенсивности свободнорадикальных процессов в клетках (уменьшение количества ДК, ТБК-РП на 11,5%, табл. 1), что может свидетельствовать о более высокой активности антиоксидантной системы у группы опытных животных.

Таблица 1. Состояние тромбоцитарного гемостаза и плазмокоагуляции после 14-дневного введения медвежьего жира (по 14 крыс в группе), М ± m.

Исследуемые показатели

Без введения МЖ

На фоне введения МЖ

PLTm, ×109

958±26

868±22*

Дискоциты, %

56,0±1,9

64,1±2,1*

АФ, %

44,0±2,9

36,2±3,1*

АОК, %

1,9±0,4

2,7±0,3

АЧТВ, с

21,3±1,4

18,8±2,4

ПТВ, с

28,4±1,3

30,4±1,6

ТВ, с

17,4±1,5

24,1±1,4*

РКМФ, мг%

5,2±0,3

4,6±0,1*

ФГ, г/л

4,0±0,1

5,0±0,1*

АТ-III, %

108,8±13,8

162,8±9,8*

ДК, А/мг ЛП

0,18±0,02

0,16±0,03

ТБК-РП, ед/мг ЛП

0,61±0,03

0,54±0,02*

Примечание: PLTm – содержание тромбоцитов (микроскопия), АФ – активированные формы, АОК – клетки, вовлеченные в агрегаты, АЧТВ – активированное частичное тромбопластиновое время, ПТВ – протромбиновое время, ТВ – тромбиновое время, АТ-III – антитромбин-III, ФГ – фибриноген, РКМФ – растворимые комплексы мономерного фибрина. ДК – диеновые конъюгаты, поглощающие при длине волны 232 нм, ТБК-РП – продукты, взаимодействующие с тиобарбитуровой кислотой, ЛП – липид. Знаком * отмечены достоверно отличающиеся показатели (р<0,05) по сравнению с интактным контролем.

Ограничение активации липопероксидации в плазме крови данной группы животных отразилось и на показателях системы гемостаза.

Как следует из данных таблицы 1, дополнительный прием медвежьего жира в течение 14 дней сопровождался умеренным снижением количества тромбоцитов (на 9,4%), увеличением относительного содержания дискоцитов (на 14,5%), а также уменьшением числа активированных форм. Уменьшилось число клеток, вовлеченных в агрегаты.

Со стороны плазменного гемостаза существенно (на 46,9%) возросла активность антитромбина-III, что привело к приросту концентрации фибриногена, удлинению тромбинового времени (на 38,5%) и уменьшению содержания РКМФ.

Заключение.

Таким образом, введение медвежьего жира в рацион экспериментальных животных, ограничивает активацию свободнорадикальных процессов, что, по-нашему мнению, способствует повышению противосвертывающего потенциала плазмы крови.

Список литературы:

1. Балуда В.П., Баркаган З.С., Гольдберг Е.Д. и др. Лабораторные методы исследования системы гемостаза. Томск, 1980, 310 с.
2. Барбараш О.Л., Кашталап В.В., Каретникова В.Н. и др. Клиническая значимость показателей эндотелиальной дисфункции, оксидативного стресса и гемостаза у больных инфарктом миокарда // Патология кровообращения и кардиохирургия. — 2007. — № 2. — С. 28-33.
3. Бышевский А.Ш., Умутбаева М.К., Алборов Р.Г. Антиоксиданты в коррекции гемокоагуляционных сдвигов. М: Медицинская книга, 2004. 80 с.
4. Кершенгольц Б.М., Журавская А.Н. // Биопрепараты из природного северного сырья как средства коррекции экологического неблагополучия / Кершенгольц Б.М., Журавская А.Н., Шеин А.А., Шашурин М.М. / Известия Самарского научного центра Российской академии наук. – 2010. - № 1-8. – С.2041-2046.
5. Найданова Э.Г., Бураева Л.Б. Влияние гиполипидемического растительного средства на липидный обмен и перекисное окисление е липидов // Бюллетень ВСНЦ СО РАМН. – 2009. - №3. – С. 216-218.
6. Никулина Е.Г. Протективные эффекты природных цеолитов при тромбинемии: Дис. … канд. Социол. Наук. Челябинск. 2011. – 126.
7. Шахматов И.И., Бондарчук Ю.А., Вдовин В.М., Алексеева О.В. Влияние элеуторококка на систему гемостаза у иммобилизированных крыс // Экспериментальная и клиническая фармакология. – 2007. - № 2. – Т. 70. – С. 45-47.
8. Шитикова А.С. Тромбоцитарный гемостаз. СПб, 2000. 225 с.

Интересная статья? Поделись ей с другими: